Statele Unite ale Americii au recunoscut independența Republicii Moldova pe 25 decembrie 1991, și au stabilit relații diplomatice cu țara noastră pe 18 februarie 1992.

Republica Moldova și-a deschis Ambasada în Washington DC în decembrie 1993, iar Statele Unite ale Americii și-au deschis Ambasada la Chișinău în martie 1992.

Începând cu 1998, sediul Ambasadei este situat în Districtul istoric Sheridan-Kalorama, fiind localizat pe adresa 2101 S Street, NW. Anterior, acesta a fost situat pe 1511 K Street, NW.

Construită în 1898, clădirea în stil Beaux-Arts a servit inițial drept reședința privată a celui de-al patrulea Secretar SUA al Agriculturii James "Tama Jim" Wilson (în oficiu din 5 martie 1897 până pe 5 martie 1913). Edificiul respectiv a mai aparținut, adițional, Imperiului Otoman (oficiile Legației Turciei), Imperiului Persan (oficiile Legației Persane în perioada dinastiei Qajar), Secretarului adjunct al Departamentului de Trezorerie al SUA James H. Moyle, Directorului U.S. Reclamation Service Frederick Haynes Newell, economistului Alfred E. Kahn, Guvernatorului Serviciului Poștal al SUA Timothy Lionel Jenkins, fiind și sediu al Scientific Time Sharing Corporation și periodicului American Visions.